糜胰蛋白酶制法/工艺

提取将新鲜或冷冻锗胰，解冻、洗净并投入绞肉机绞碎，按照猪胰浆量加2倍量体积的硫酸溶液（0.125mol/L），搅拌均匀，搅拌下提取1h，调节PＨ３右左，于4⁰放置过夜。次日，用双层纱布过滤，滤渣用等体积冷硫酸溶液（0.125mol/L），重复提取1次，合并2次滤液，得提取液。
猪胰脏^{H{2SO₄;pH3;4⁰}→_提取提取液
分段盐析在不断搅拌下，将提取液中逐渐加入工业用硫酸铵一定量，使硫酸铵的饱和度达25%。再加少量活性白陶土一定量助滤，放置低温处，1d后过滤，滤液再加硫酸铵（CP）同上操作，得复2次，收集25%～65%饱和度沉淀部分，得粗制滤饼。
提取液^{(NH₄)₂SO₄}→_分段盐析粗制滤饼
透析、盐析将粗滤饼用3倍体积的冷蒸馏水溶解，在低温下对pH5.5的乙酸缓冲液（0.01mol/L）透析，过滤，在清液加硫酸铵（CP）一定量，至硫酸铵饱和度达65%，将沉淀抽滤，得透析滤饼。
粗制滤饼^{pH5.5;醋酸缓冲液；(NH₄)₂SO₄}→_{透析；盐析}透析滤饼
盐析、除杂质将透析饼在3倍体积冷蒸馏水溶解，调节pH3～3.5，加硫酸铵（CP）一定量，至硫酸铵饱和度达25%，室温下放置3～5h后，用0.5%活性炭助滤，得澄清滤液。然后在不断搅拌下，将100ml的澄清滤液缓慢加入预热至25⁰左右的乙醇10ml（乙醇浓度达10%），在室温下放置3h后过滤，得澄清滤液。
透析滤饼^{(NH₄)₂SO₄乙醇;pH3}→_{盐析；去杂蛋白}滤液
盐析、透析、再盐析滤液加硫酸铵（CP）一定量，使硫酸铵达65%饱和度，盐析后过滤，得滤液。然后将硫酸在低温下对pH5.5乙酸缓冲液（0.01mol/L）透析2d，过滤除去沉淀，清液加硫酸宛如（CP）至65%饱和度，再盐析，过滤得滤饼。
滤液pH5.5;醋酸缓冲液；(NH₄)₂SO₄→_{盐析；透析；再盐析}滤饼
结晶、再结晶滤饼溶于3倍体积冷蒸馏水中，用硫酸（2.5mol/L）调节pH至3，用酸洗后滑石粉助滤，在不断搅拌下，于澄清滤液的每100ml中缓慢加入33.3ml的饱和硫酸铵溶液，将浑浊过滤除去。滤液用氢氧化钠（2mol/L）调节pH至6 ，再加入一定量饱和硫酸铵溶液至似混非混程度，于25⁰C下放置，待2h后即有结晶析出，次日收集结晶，得结晶滤饼。按上述操作程序得复结晶1次，得二次结晶滤饼。
滤饼^{(NH₄)₂SO₄;pH6;25⁰}→_{结晶；再结晶}再结晶滤饼
透析、沉淀在结晶滤饼中加入适量的稀盐酸，使之溶解。溶解后的滤饼对pH3～3.5的冰水透析，透析液滤清后，在低温下，每100ml透析滤清液中缓慢加入95%乙醇（CP）70ML，沉淀离心、过滤，用丙酮脱水3次，真空干燥，得注射用结晶糜胰蛋白酶原料。收率4～7g/kg（猪胰）。
再结晶滤饼^{冰水；乙醇；pH3}→_{透析；沉淀}结晶糜胰蛋白酶
透析、沉淀在结晶母液加硫酸铵一定量，使硫酸铵至70%饱和度，过滤，滤饼同上操作，得外用糜胰蛋白酶原料。
再结晶母液^{(NH₄)₂SO₄70%}→_{透析；沉淀}外用糜胰蛋白酶原料

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