药中的氯磺丙脲液相色谱法

A 原理
    将氯磺丙脲溶于流动相中，通过液相色谱法在240nm外用紫外检测器测定。 
B 仪器
B.a 液相色谱仪
    配备的进样阀能导入20μl注射液，紫外检测器能在240nm外检测，记录器/积分仪。 
B.b 柱
    直径为5－6μm的球状颗粒，4.6mm×25cm。 
B.c 过滤器
    微孔型HVLP，孔隙度0.45μm。 
C 试剂
C.a 流动相
    水与有机相之比为52/48。 
C.a.1 水相
    乙酸-水(1+99) 
C.a.2 有机相
    液相色谱级CH3CN。 
C.b 氯磺丙脲标准溶液
    转移约50mg准确称量的USP氯磺丙脲参比标准至100ml容量瓶中，并溶于流动相中。将此溶液定量地用流动相稀释至最终浓度约为0.05mg/ml。 
C.c 分离度测试溶液
    流动相中含氯磺丙脲十对-氯苯-氯磺酰(PCBS)各0.05mg/ml。 
D 样品的制备
    准确称量1份相当于45－55mg氯磺丙脲的片剂细粉末，转移至100ml容量瓶中。加入约70－80ml流动相，充分振摇6－8min〔或超声3－4min〕，并用流动相稀释至体积。再将此溶液用流动相定量稀释至最终浓度约为0.05mg/ml。通过0.45μm过滤器过滤部分溶液用作液相色谱分析。 
E 系统的适应性
    流动相的流速调节至约1.5ml/min时，氯磺丙脲的保留时间应不小于4.0min。根据所要求的保留时间，调整流速和/或溶剂的比例〔CH3CN不得超过50%〕。色谱柱应适合下述参数：理论塔板数(n)不小于1500；拖尾系数(I)不大于1.5；氯磺丙脲与PCBS之间的分离度不小于2.0；连续4次注入标准，相对标准偏差应小于2.0%。 
F 测定
    注射20μl的标准或样品溶液。测定峰响应值〔峰面积和峰高〕，并计算氯磺丙脲的含量：
氯磺丙脲(mg/片)＝(r/r')×〔C/W〕×DF×ATW
式中r和r'分别为样品和标准的响应值；C为氯磺丙脲标准溶液的浓度(mg/ml)；W为样品的质量(g)；DF为样品的稀释系数(ml)；ATW为片剂的平均重量(g/片。 以上资料由西亚试剂：化学品数据库提供