西亚试剂 ：Cell：癌症靶点PKC的阴阳两面

Protein kinase C (PKC)是哺乳动物体内一类非常重要的蛋白激酶，主要分为常规PKC(conventional PKC， cPKC)，新型PKC(noval PKC，nPKC)以及非典型PKC(atyptical PKC，aPKC)，研究比较充分的是cPKC及nPKC。这两类PKC的磷酸化位点主要由三个(激活区，回转区以及疏水区)。在免疫反应过程中，PKC磷酸化激活可以介导下游NF-kB的激活从而促进一系列细胞因子的释放。更重要的是，自从研究发现PKC是肿瘤细胞促进性佛波酯(tumor-promoting phorbol esters)的受体后，它作为治疗癌症的一类潜在靶点受到了广泛的关注。然而，在使用针对PKC的药物治疗癌症的临床试验却遭遇失败。对于其中的原因，来自美国UCSD的Alexandra C. Newton课题组最近在《Cell》杂志上发表了他们的研究结果。

作者首先几种分析了大量癌症患者的样本，发现他们癌细胞中PKC发生了各种各样的突变，而且分布十分随机。随后作者针对这些突变的PKC系统地进行了序列与功能的分析。实验结果显示：

1、在PKC C1/C2区域发生的突变使PKC失活。C1区域使cPKC与nPKC向膜迁移并与DAG结合从而激活的关键区域，所以作者希望了解这一区域的突变体是否还保持原有功能。通过FRET实验，作者发现癌细胞PKC在这一区域的突变体失去了上膜的能力。与此相应，突变后的PKC与DAG结合的能力也降低了。之后，作者比较了C2区域的若干突变，得到了与上述相似的结果。

2、PKC 激酶区域的突变使PKC失活。之后作者检测了PKC 激酶区域的突变是否对其功能有所影响。实验结果显示：激酶位点的突变造成了PKC活性的下降，特别的是，这些突变体PKC在加入刺激之前就已经稳定分布在膜表面了(与野生PKC受到刺激时才上膜相对)。

3、癌症患者癌细胞内PKC的突变中大部分都是失活突变(loss-of-function)。随后作者光谱地比较了癌症患者样本中的PKC突变的活性，发现这些突变中大部分都造成了PKC的失活。

4、PKC的野生化编辑能够抑制肿瘤的发生。最后，作者将野生的PKC-beta转入了PKC单染色体突变的大肠癌细胞系中，发现野生PKC的导入充分抑制了肿瘤的生长，随后作者利用crispr/cas9系统也证明了这一现象。

综上，在大量患者的样本基础上，作者做了大量细致的分析工作，证明了PKC在癌细胞内突变失活的现象，并且证明这一失活是促进肿瘤生长的一个重要的原因。因此，在以后选择治疗癌症的手段是，要慎重考虑抑制PKC活性到底具有正面的还是负面的影响。以上资料由西亚试剂：http://www.xiyashiji.com/提供