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西亚试剂 :EBF1 3’UTR与EIN2以及EIN5等因子共定位于P-body

乙烯通过EIN2作用在3’UTR上负调翻译以及顺式作用元件PolyU。(A)报告RNA GFP-3’UTR的结构;(B)不同突变体内GFP荧光变化;(C-D)PolyU及其二级结构;(E)在ebf1突变体中表达内源EBF1启动子驱动的野生型EBF1(EBF1/ebf1)以及删除3’UTR(EBF1△3’UTR/ebf1) 和7个PolyU(EBF1△PolyU/ebf1)的EBF1。

研究人员接着探索了EIN2通过EBF1/2 mRNA 3’UTR调控翻译过程的生化机制。他们首先观察了含有EBF1 3’UTR的报告RNA的亚细胞定位,并发现乙烯诱导该RNA在细胞质内形成点状结构。有意思的是外源乙烯处理可以促进EIN2和含有EBF1 3’UTR的报告RNA共定位在点状结构中。RNA-IP(RNA immunoprecipitation)实验表明乙烯可以促进EIN2和EBF1 3’UTR在植物体内发生相互作用。在真核生物中,P-body(processing body)是mRNA转录后调控的重要场所,参与mRNA降解、翻译抑制等重要过程。上文提到的EIN5,又称作AtXRN4,是酵母中5’3’外切核酸酶XRN1(5`-3` EXORIBonUCLEASE 1)的同源蛋白,是已知的参与形成P-body的标志蛋白。郭红卫研究组发现,乙烯能够促进EIN2以及包含EBF1 3’UTR的报告RNA与EIN5共定位于细胞质内中的P-body。进一步的生化分析表明EIN2能够与包括EIN5、UPF1(UPSTREAM OPEN-READING frame 1)、PAB2(POLY(A) BINDING 2)、PAB4、 PAB8等在内的多种P-body组分在体内发生相互作用。以上资料由西亚试剂http://www.xiyashiji.com/