西亚试剂：IDA-I及其上游的AAH基因的缺失会导致DAEC菌无法粘附于HeLa细胞

在该研究中，邵峰实验室的研究人员首次通过遗传学方法，证明AIDA-I及其上游的AAH基因的缺失会导致DAEC菌无法粘附于HeLa细胞。含有AAH和AIDA-I的重组细菌具有粘附性，且AIDA-I被糖基化修饰，但在DAEC中缺失AAH却不能使AIDA-I糖基化丧失。

通过构建和筛选DAEC基因组文库，他们成功鉴定出了DAEC中的另一个参与AIDA-I糖基化的蛋白，命名为AAH2。AAH和AAH2同时缺失后，AIDA-I完全不能被糖基化。AIDA-I这类粘附素隶属于细菌自主转运蛋白(Autotransporter)家族，通常由信号肽，passenger结构域以及跨膜区三部分组成。

研究人员在E. coli中共表达了AAH/AAH2和AIDA-I passenger结构域片段，通过质谱分析证明AAH/AAH2能够使AIDA-I的多个丝氨酸残基上发生七碳糖(heptose)糖基化修饰。体外生化实验首次显示AAH/AAH2具有七碳糖转移酶活性。Heptose是细菌内毒素中特有的一类糖分子，遗传敲除实验也证明了heptose合成缺陷菌株中AIDA-I无法发生糖基化修饰。研究人员还解析了糖基化的TibA passenger结构域的三维晶体结构。该结构清晰展示了passenger结构域上的多个丝氨酸残基共价连接了heptose。这些研究确定了AAH/TibC是一类全新的七碳糖转移酶。

该研究还发现，重组表达的AAH 或者TibC蛋白呈现出黄褐色，电感耦合等离子体质谱等生化分析结果表明AAH/TibC是一类铁结合蛋白，组装形成同源十二聚体。AAH/TibC同源蛋白广泛分布于革兰氏阴性致病细菌中，包括沙门氏菌，志贺氏痢疾杆菌，伯克霍尔德氏菌，香港海鸥菌，鼠类柠檬酸杆菌和多种致病性大肠杆菌等。所有家族成员蛋白均呈现出黄褐色并以寡聚体形式存在，表明该家族是一类含铁的十二聚体七碳糖转移酶，他们将该家族定义为BAHT(bacterial autotransporter heptosyl-transferase)。进一步研究表明，鼠类柠檬酸杆菌编码的粘附素被其对应的BAHT高度糖基化。在小鼠感染模型中，粘附素或BAHT编码基因或者糖基转移酶酶活的缺失都会导致柠檬酸杆菌不能在肠道中有效定植，从而进一步确定了BAHT糖基转移酶活性在感染过程中的重要生物学功能。

该研究首次定义了一类新型的细菌七碳糖转移酶家族，并揭示了革兰氏阴性致病菌在宿主体内有效定植的全新分子机制。该研究也为抗生素治疗细菌感染的替代途径——抗粘附治疗提供了新的理论指导

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