西亚试剂：Nanog基因上CDK9/KLF4的ChIP-Seq结果

之前已有研究表明，P-TEFb复合体会通过其催化亚基CDK9，磷酸化RNA Pol II，比较ESCs和MEFs，研究发现ESCs中CDK9表达量更高，RNA-Seq数据表明，如果在MEFs中沉默CDK9，会明显下调多能性基因表达，包括其著名靶基因Hexim1。在很多细胞中，CDK9都会与HEXIM1组成复合物，保持失活状态，由于另一个蛋白BRD4会通过去除HEXIM1激活CDK9，研究者进一步探索了MEFs重编程过程中BRD4和HEXIM1的角色，通过构建靶向BRD4的shRNA、过表达载体及不同的BRD4及CDK9突变体，利用ChIP-Seq实验，研究者发现，BRD4会增强RNA Pol II的Ser2P修饰水平，强烈结合于多能性基因启动子区域，诱导多能性基因表达。这些结果证实，BRD4的确可以代替HEXIM1与CDK9互作，激活CDK9，促进多能性基因的表达，是重编程的一个正向调节因子，而HEXIM1则会发挥与BRD4相反的作用，它会阻止多能性基因表达，是重编程过程的一个障碍。

由于CDK9需要转录因子帮助才能在特定位置结合，修饰RNA Pol II，为了鉴定MEFs中介导CDK9富集的转录因子，研究者将OSKM四个重编程因子转入HEK293T细胞内，通过免疫共沉淀及ChIP-Seq数据分析，证实KLF4会与CDK9共同结合于多能性基因启动子区，对RNA Pol II进行修饰，改变其暂停状态，诱导多能性基因开始转录。

至此，研究者确认了细胞重编程过程中一条完整的调控通路，在该通路中，不同调控因子相互作用，通过RNA Pol II的磷酸化水平，促使其在多能性基因启动子区域由“暂停”状态进入“延伸”状态，诱导这些基因转录。对此通路的研究，有助于人们更好地理解细胞命运如何发生变化，显著提高体细胞重编程的效率，同时也对诱导多能干细胞在治疗重大疾病如帕金森、心血管疾病等方面的应用研究具有重要意义。

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