西亚试剂：快速高效敲除干细胞基因的技术

人体多能干细胞(hPSCs)不仅能被用于临床的再生研究应用中，而且也能作为解析复杂性状和特征的独特平台，阐明其背后的基因和分子途径。为了实现这一目的，科学家们开发了多种遗传操控方法，但是这些方法依然存在各种问题，我们需要快速，具有可操控性的生物学手段。

在这篇文章中，研究人员就利用CRISPR和TALEN，这两种备受关注的基因组编辑技术，研发出了一种人类多能干细胞基因组编辑平台。研究人员将这一平台称为iCRISPR。

iCRISPR能用于基因功能丧失研究中，快速，高效的敲除人体多能干细胞中的等位基因，也可以针对一些精确的疾病模型，通过特定的核苷酸变换，进行多能干细胞纯合体敲除。

通过进一步实验，研究人员验证了双重和三重基因敲除hPSC细胞系一步法的有效性，同时也证明了在多能干细胞分化过程中能进行阶段特异性诱导基因敲除，这对于发育生物学研究来说意义重大。

由此研究人员指出，iCRISPR平台尤其适合用于解析人类疾病研究中的复杂遗传相互作用，以及多效性基因功能，这将有助于进行人体多能干细胞高通量遗传分析。

除了这项研究之外，去年来自加州大学旧金山分校的研究人员提出了一个相似的名称：CRISPRi，他们发现当缺失核酸内切酶活性的Cas9与一种导向RNA共表达时候，会产生一种DNA识别复合物，这种复合物能特异性干扰转录延伸，RNA聚合酶结合，或转录因子结合。

由此研究人员研发出了这种CRISPRi系统，这一系统能有效抑制大肠杆菌中靶向基因的表达，并且不会出现脱靶效应。而且利用CRISPRi，还可以同时抑制多个靶基因，这种作用也是可逆。研究人员还证明，该系统也适用于哺乳动物细胞中的基因表达抑制。