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作者首先用RNA-pull down 实验,用LncTCF7的正向序列和反向序列,然后通过电泳和质谱,找到正义链特异性结合的蛋白质,并通过质谱和WB确定LncTCF7结合的主要是BRG1,BAF170,SNF5(图9):通过LncTCF7截短体实验,得到LncTCF7的468-683是结合这三个转录因子的区域, EMSA进一步验证LncTCF7可以和三个转录因子结合。而且干扰三个转录因子也能产生相同的表型(图10),证明找到了关键结合的转录因子。
图9
图10
结论
本篇文章在设计思路上环环相扣,实验验证方式都是多种手段验证,是一篇不可多得的文章。最后展示全文的模式图:
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