西亚试剂：RNAi经典机制

目前关于基因沉默的理论认为，转录后水平的基因沉默，主要包括起始阶段、效应阶段和倍增阶段。

1、 起始阶段

外源性导入或由转基因、转座子、病毒感染等多种方式引入dsRNA， 在细胞内被Dicer特异性识别切割成21~23nt长度的带有3′端单链尾巴及磷酸化的5′端的短链dsRNA，即siRNA;

2、 效应阶段

siRNA与含有Ago蛋白的复合物结合形成RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex，RISC)，在ATP供能情况下，激活的RISC将siRNA双链分开，Ago负责催化siRNA反义链寻找互补的mRNA链，在距离siRNA 3'端12个碱基的位置将mRNA切断降解，从而阻止靶基因表达，使基因沉默;

3、 倍增阶段

siRNA在RdRP的作用下，以mRNA为模板，siRNA为引物，扩增产生足够数量的dsRNA，作为底物提供给Dicer酶，产生更多的siRNA，可再次形成RISC，并继续降解mRNA，从而产生级联放大效应。如此反复倍增，使RNAi的作用进一步放大。因此少量的siRNA就可以产生高效的基因沉默效果。

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