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单组分TMB显色液

别名:单组分TMB过氧化物酶底物液 产品编号:18589

订货信息

订货编号 产品名称 规格 包装 价格 数量 操作
A27832-100ml 单组分TMB显色液 TMB,稳定剂 100ml 186.00

化学性质

3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一种过氧化物酶底物,用于ELISA 反应。底物产生一种可溶性淡蓝色的末端产物,可在370 或 655 nm在分光光度计上读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止,450 nm读取。

TMB又分可溶型和沉淀型。 可溶型:与HRP反应形成可溶性蓝褐色产物,适用于ELISA及其他通过液体反应检测HRP的应用,与HRP反应形成沉淀性蓝褐色产物,一步即用型溶液,无需混合,方便快捷 。 沉淀型:适用于Western Blot及其免疫沉淀化学等,一步即用型溶液,无需混合,方便快捷 单组分TMB过氧化物酶底物正常情况下淡黄色、淡蓝色或者是淡绿色。底物溶液在650nm时检测OD值小于0.04。

质量标准

使用方法
使用之前,以超纯水反复洗涤的适当容器,倒出适量单组分TMB底物溶液,待溶液达到室温即可使用。
加液:加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加TMB底物100-150uL, 37°C温育15-30分钟。
终止(备选):加等体积的1N的HCl或者2N的H2SO4来终止反应。酶标孔中反应液从蓝色变为黄色。
读数:终止反应后,30分钟内在450nm处读数。不加终止液,显色更加稳定,可以在620-650nm处读数。


注意:
降低底物强度:如果出现高的反应背景和/或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可以在加入终止液后马上读数;另外,可以进一步稀释一抗和/或HRP结合物。为了降低非特异性背景颜色,推荐进一步降低一抗和/或HRP结合物的浓度,尽量避免降低底物浓度。动力学检测:TMB单组分底物在与过氧化物酶反应时产生一种蓝色,可以在加底物后620-650nm处读数,不需终止反应。


稳定性:2-8°C条件下,大于18个月。
敏感性:相当于显色AB双液,或高于。
组成:TMB,稳定剂。

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